Так, штамм вибриона Эль-Тор 3119 серовара Огава, обладавший типичными свойствами, чувствительностью к холерным диагностическим фагам и холерогенностью для кроликов-сосунков в дозе 103, засевали в простерил изоливанные автоклавированием пробы воды из Дона. Через 5 мес после контаминации в 1 из 5 проб, хранившейся при комнатной температуре, наряду с типичными колониями вибриона Эль-Тор в посевах были обнаружены 3 очень мелкие, плотные, с вдавленным центром, вросшие в агар колонии. Их морфология не отличалась от L-форм вибрионов, полученных под влиянием пенициллина. Культуры из этих колоний сохраняли типичные биохимические свойства, агглютинировались до 1/8 титра холерной О-сывороткой, до полутитра - сывороткой Огава, а сыворотками Инаба и RO - в разведении 1:100. В РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом положительные результаты с исходным и измененным штаммами получены при концентрации 105 микробных клеток (м.к.). В результате изменчивости полученный вариант штамма вибриона Эль-Тор утратил чувствительность к бактериофагу Эль-Тор. При внутрикишечном заражении кроликов-сосунков в дозе 105 м.к. гибель животных наступала через 24-48 ч с развитием четко выраженного холерогенного синдрома. У павших животных толстый отдел кишечника был сильно растянут и заполнен слегка опалесцирующей жидкостью. При посеве содержимого кишечника на пластинках агара выросли колонии только с измененной морфологией, однако в мазках из этих колоний в подавляющем большинстве обнаруживались подвижные и неподвижные вибрионы. Следует отметить, что при изучении реверсии L-форм неоднократно наблюдалась подобная морфология колоний у культур-ревертантов первых пассажей. При этом показана возможность быстрого восстановления вирулентности при реверсии даже условно стабильных L-форм холерных вибрионов. Учитывая, что описанные выше случаи выделения L-форм вибрионов Эль-Тор из речной воды в естественных условиях приходились на осеннее и зимнее время при низкой температуре воды (от 10-12 до 3-4°С), а выделение типичных форм обычно имело место при достижении температуры воды 16- 18 °С, возникла 2-я гипотеза: не является ли изменение температуры именно тем фактором, который способствует реверсии L-форм вибрионов, длительно сохраняющихся в воде при низких температурах, в исходную форму. Это представляется весьма правомерным, если учесть, что физико-химические свойства воды Дона в различные сезоны года практически не подвергались сколько-нибудь существенным колебаниям. С целью проверки данной гипотезы были поставлены специальные опыты в политермостате, конструкция которого позволяла одномоментно хранить более 20 проб воды при температуре от 2 до 28 °С. При этом каждая предыдущая проба имела температуру на 1 °С ниже, чем последующая. В результате было показано, что в среде, бедной органическими веществами, близкой по физико-химическому составу к речной воде, L-формы вибрионов Эль-Тор способны сохранять жизнеспособность без реверсии в бактериальные формы в течение 30 дней (срок наблюдения) при температуре до 18 °С.